La diffusion de cette deuxième saison de la série animée Harley Quinn suit de près la fin de la première saison : les premières images diffusées par le trailer annoncent la présence de Mister Freeze et Catwoman, ainsi qu'une romance entre Quinn et Poison Ivy...
Harley Quinn a finalement rompu avec le Joker et s'efforce d'être à la hauteur pour régner sur Gotham City en se positionnant comme la crème des criminels.